Il ruolo del cromosoma Y nell’infertilità maschile

Introduzione
Mentre il cromosoma X è condiviso tra i due sessi, la presenza del cromosoma Y nelle cellule somatiche rappresenta una peculiarità dei maschi.Già in seguito alla prima descrizione di questo cromosoma nel 1921 la comunità scientifica ha espresso delle opinioni divergenti sul suo ruolo ed importanza nell’uomo. Data l’abbondanza di sequenze non codificanti, per un lungo periodo di tempo questo cromosoma è stato considerato inerte dal punto di vista genetico e la sua estinzione futura è stata evocata da alcuni (Aitken and Marshall; 2002). Tuttavia questa visione pessimista è stata cambiata radicalmente in seguito all’identificazione di un numero inaspettato di geni con espressione sia ubiquitaria che testicolo–specifica. Infatti, il numero totale di trascritti della regione eucromatica “Male specific Y (MSY)” è 156 e questa parte del cromosoma contiene 27 geni a singola e multi-copia (Skaletsky et al. 2003). La maggior parte dei geni MSY è coinvolta in funzioni come la determinazione del sesso maschile (SRY) e la spermatogenesi (geni delle regioni Azoospermia factor (AZF), sul braccio lungo del cromosoma Y). Di conseguenza delezioni o mutazioni di questi geni possono portare al “sex-reversal” o a difetti della spermatogenesi. Il ruolo del cromosoma Y nell’infertilità maschile è ormai accertato e le “microdelezioni” delle regioni AZF rappresentano la causa genetica più frequente di oligo/azoospermia. In questo articolo saranno discussi i tre principali argomenti inerenti al cromosoma Y e l’infertilità maschile: le microdelezioni AZF, le delezioni parziali della regione AZFc e il ruolo degli aplogruppi del cromosoma Y.

Le microdelezioni del cromosoma Y
Le microdelezioni del cromosoma Y sono la causa genetica – molecolare – più frequente dell’infertilità maschile (Krausz et al. 2003). Grazie all’identificazione di sequenze specifiche (STS) del cromosoma Y – che ha permesso lo studio su larga scala del suo braccio lungo – sono state distinte tre regioni critiche per la spermatogenesi, chiamate AZoospermia Factor (AZFa, AZFb e AZFc) (Tiepoli e Zuffardi 1976; Vogt et al. 1996). Tali regioni contengono geni ed unità trascrizionali, la maggioranza dei quali presenta un’espressione specifica testicolare (Fig. 1).

Figura 1 - Rappresentazione schematica della struttura del cromosoma Y con i principali geni delle regioni AZF.


La relativa alta incidenza delle delezioni del cromosoma Y è legata alla sua struttura, ricca di sequenze ripetute che rendono il braccio lungo del cromosoma Y particolarmente suscettibile a delezioni che insorgono per ricombinazione omologa intracromosomica tra regioni con elevata omologia di sequenza (Fig. 2). Infatti, studi condotti su diversi soggetti hanno mostrato che i punti di rottura - e quindi il frammento di DNA rimosso - sono comuni in ciascun tipo di microdelezione

Frequenza delle microdelezioni e loro specificità per oligo/azoospermia
Sebbene il termine “fertilità” non sia sinonimo di “normozoospermia” – infatti il 10% degli uomini “fertili” sono affetti da oligozoospermia severa (Almagor et al. 2001) – molti studi hanno utilizzato come controllo uomini “fertili” di cui non è noto lo spermiogramma. Per questo motivo, è plausibile che tra i soggetti “fertili” ci possano essere dei portatori di anomalie genetiche (incluse quelle del cromosoma Y) con effetto negativo sulla spermatogenesi. Il gruppo di controllo ideale per lo studio dei geni del cromosoma Y è quindi rappresentato dai soggetti normozoospermici e possibilmente fertili.
Lo screening per le microdelezioni del cromosoma Y in un ampio gruppo di soggetti normozoospermici (circa 1000 casi), ha dimostrato la specificità di queste delezioni per i disturbi della spermatogenesi, data l’assenza di questa anomalia genetica in questi individui (Krausz et al. 2003).
Nei lavori presenti in letteratura sono stati riscontrati valori di incidenza delle microdelezioni che variano da 1,3% a 28%; questa variabilità di incidenza può essere legata ai vari fattori, come per esempio l’accuratezza dell’analisi (sia falsi positivi che falsi negativi), il diverso disegno di studio, il differente criterio di definizione clinica dei pazienti oppure le diverse origini etniche/geografiche dei soggetti studiati. Uno dei fattori più influenti sembra essere la diversa composizione della popolazione studiata, ovvero il numero maggiore o minore di pazienti azoospermici rispetto a quelli oligozoospermici. Infatti, la frequenza con cui insorgono le microdelezioni è inversamente proporzionale al numero di spermatozoi presenti nell’eiaculato ed è quindi maggiore negli pazienti azoospermici (Krausz et al. 1999a, 1999b).

Figura 3 - Rappresentazione della relazione esistente tra concentrazione di spermatozoi e frequenza delle microdelezioni. La figura in alto mostra come l'incidenza delle microdelezioni diminuisce al crescere del numero di spermatozoi. La tabella in basso indica l'incidenza delle microdelezioni riscontrata in un gruppo di 449 soggetti infertili, suddiviso in tre categorie in base al loro numero di spermatozoi presente nell'eiaculato (Krausz et al. 1999a; Krausz et al. 1999b; Krausz et al. 2001).

Per quanto concerne i fattori legati all’accuratezza dello screening, sebbene si tratti di un test genetico di relativa facile esecuzione, in realtà un’alta percentuale di laboratori fornisce risultati errati (Simoni et al. 2004). Per ovviare a questo problema e quindi rendere i risultati confrontabili sono state messe a punto delle linee guida per l’analisi molecolare di routine delle microdelezioni del cromosoma Y. Esse si avvalgono dell’amplificazione di un set di primers relativo a specifici STS e permette di identificare il 99% delle delezioni del braccio lungo del cromosoma Y che risultano avere un significato clinico (Simoni et al. 2004).
L’ipotesi che l’origine etnica potesse contribuire alla variabilità di frequenza delle microdelezioni è stata confutata a seguito dello studio di quattro differenti popolazioni (italiana, francese, danese ed iraniana) con l’utilizzo di un set di primers simile e di un criterio omogeneo per la definizione dei pazienti idiopatici e non idiopatici; tale analisi ha riportato una incidenza delle microdelezioni nei pazienti variabile tra 1,5% e 10,8% (Krausz et al. 1999a; Krausz et al. 1999b; Krausz et al. 2001). La frequenza più alta si riferisce allo studio che presenta un numero maggiore di pazienti azoospermici rispetto a quelli oligozoospermici. Se vengono calcolate le frequenze nel solo sottogruppo di soggetti idiopatici con oligozoospermia severa ed azoospermia l’incidenza delle delezioni osservata tra i vari gruppi etnici diventa più omogenea (10%). Questi dati indicano che l’origine etnica non rappresenta un fattore cruciale per l’incidenza delle microdelezioni.

Correlazioni genotipo-fenotipo
Ciascun tipo di microdelezione insorge con frequenza diversa nella popolazione ed è associata a quadri clinici distinti di anomalie della spermatogenesi. La microdelezione più frequente è quella della regione AZFc (60%); seguono poi le delezioni della regione AZFb, AZFb+c e AZFa+b+c (35%). Le delezioni della regione AZFa sono estremamente rare (5%). La delezione della regione AZFa, che rimuove circa 792 Kb (Kamp et al. 2000, Sun et al. 2000), avviene per ricombinazione omologa tra due sequenze identiche, HERVyq1 e HERVyq2, e determina la rimozione degli unici due geni presenti in questa regione: USP9Y e DBY. Il quadro clinico associato a questa microdelezione è l'azoospermia determinata da un quadro istologico di Sindrome a Sole Cellule di Sertoli (SCOS) di tipo I, ovvero dall'assenza totale di cellule germinali nei tubuli seminiferi. La delezione della regione AZFb rimuove 6.2 Mb (incluse 32 copie di geni e unità trascrizionali) ed avviene per ricombinazione omologa tra i palindromi P5 e P1 prossimale. I pazienti con questa microdelezione presentano azoospermia determinata da un quadro istologico di arresto della spermatogenesi (SGA). La delezione della regione AZFc (delezione "b2/b4") è quella più frequente ed insorge per ricombinazione tra due sequenze omologhe chiamate b2 e b4 (fig.4).

Significato clinico delle microdelezioni
Lo studio delle microdelezioni del cromosoma Y, oltre ad avere un valore diagnostico - definendo l'eziologia del disturbo della spermatogenesi - ha anche un valore prognostico in termini di ritrovamento di spermatozoi testicolari. Infatti, in pazienti portatori di una delezione completa della regione AZFa o di quella AZFb la probabilità di ritrovamento di spermatozoi è virtualmente zero e viene pertanto sconsigliata la biopsia testicolare multipla (TESE). Se, invece, la delezione è a carico della regione AZFc la probabilità di ritrovamento è intorno al 50% (Krausz e Forti 2000). Infine, il valore preventivo di questo screening consiste nella possibilità di proporre la crioconservazione del liquido seminale ai pazienti portatori di microdelezioni affetti da oligozoospermia, per ovviare alla progressiva riduzione del numero di spermatozoi nel tempo.

Consulenza genetica
Nella stragrande maggioranza dei casi le delezioni insorgono de novo; il cromosoma Y derivante dal DNA genomico del padre del paziente risulta quindi intatto. La delezione può insorgere nel momento dell’embriogenesi oppure può trattarsi di un mosaicismo a livello testicolare del padre del paziente. Finchè non si disponeva di tecniche di fecondazione assistita, la probabilità di una trasmissione naturale delle microdelezioni del cromosoma Y erano estremamente basse dato il danno spermatogenetico severo associato a questo tipo di anomalia genetica. Grazie alla diffusione di queste tecniche, i soggetti portatori di delezioni del cromosoma Y possono ottenere il concepimento in quanto i loro spermatozoi sono risultati pienamente fertili per entrambe le procedure IVF ed ICSI. Tuttavia, non è ancora chiaro se il potere fertilizzante degli spermatozoi e lo sviluppo dell’embrione siano confrontabili con quelli osservati per uomini non portatori di delezioni del cromosoma Y (Rossato et al. 1998; Silber et al. 1998; van Golde et al. 2001). A seguito del concepimento, la delezione del cromosoma Y è obbligatoriamente trasmessa alla progenie maschile. Sebbene l’estensione della delezione del figlio resti sovrapponibile a quella del padre, il fenotipo del futuro nascituro – ovvero la gravità dei difetti della spermatogenesi – non può essere previsto con esattezza a causa del differente background genetico e della eventuale presenza di fattori ambientali potenzialmente tossici per le funzioni riproduttive.
In pazienti portatori di delezione è stato osservato che una proporzione significativa di spermatozoi risulta nullisomica per i cromosomi sessuali; questo rappresenta un potenziale rischio per la progenie di presentare un cariotipo 45,X0 (Sdr. di Turner) oppure di sviluppare altre anomalie fenotipiche associate al mosaicismo dei cromosomi sessuali, inclusa l’ambiguità degli organi genitali. Lo screening delle microdelezioni del cromosoma Y in pazienti portatori di un mosaicismo 45,X0/46,XY con ambiguità sessuali o con Turner stigmata ha rivelato valori relativamente alti di incidenza della delezione della regione AZFc (33%; Patsalis et al. 2002). Questo dato sottolinea ulteriormente il legame tra microdelezioni e instabilità del cromosoma Y. Sebbene i dati siano confortanti, dato che i figli nati da padri portatori di microdelezioni del cromosoma Y risultano esenti da anomalie cromosomiche, non possiamo escludere che in questo gruppo di soggetti non ci sia un aumento di aborti spontanei precoci che spesso si associa a sdr. di Turner. Quindi, per evitare il rischio potenziale di trasferimento di embrioni con sdr. di Turner o mosaicismo dei cromosomi sessuali, sarebbe auspicabile la diagnosi pre-impianto.

Le delezioni parziali della regione AZFc
La delezione “b2/b4” non è l’unica delezione a carico della regione AZFc. Infatti, la presenza di numerosi ampliconi – ovvero blocchi di sequenze ripetute all’interno delle quali si trovano anche dei geni – rende questa regione particolarmente suscettibile anche ad altri tipi di delezioni, meno estese rispetto a quella “b2/b4” e chiamate “delezioni parziali”. Il loro meccanismo di insorgenza, come per le microdelezioni, consiste nella ricombinazione omologa intracromosomica tra due sequenze che presentano un alto grado di omologia (>99,9%).
Recentemente sono state descritte tre tipi di delezioni parziali: “b1/b3”, “gr/gr” (o “g1/g2”) e “b2/b3” (o “g1/g3”) (Repping et al. 2003; Repping et al. 2004; Fernandes et al. 2004).

Figura 5 - Meccanismo molecolare con cui insorgono le delezioni parziali della regione AZFc del cromosoma Y. La ricombinazione omologa intracromosomica determina la perdita del frammento di DNA interposto tra le due sequenze che ricombinano. La delezione “b1/b3” si origina per ricombinazione omologa tra gli ampliconi “b1” e “b3”; la delezione “gr/gr” si origina per ricombinazione tra gli ampliconi “g1” e “g2”; la delezione “b2/b3” prevede due step: una inversione tra gli ampliconi “b2” e “b3” ed una successiva ricombinazione tra “g1” e “g3” (modificata dal Krausz et al. 2005).


Queste delezioni rimuovono circa metà della regione AZFc, compresi alcuni geni ed unità trascrizionali testicolo specifici (Tabella 1), e possono essere trasmesse alla progenie maschile. Come evidenziato nella tabella 1, in entrambe le delezioni parziali "gr/gr" e "b2/b3" si osserva la perdita di due copie del gene DAZ (presente sul cromosoma Y di riferimento in quattro copie: DAZ1, DAZ2, DAZ3, DAZ4) e una copia del gene CDY1 (presente sul cromosoma Y in due copie, CDY1a e CDY1b), che sono considerati tra i geni più critici per la spermatogenesi. Nel caso della delezione "b1/b3", invece, vengono rimosse due copie di DAZ e due di CDY1. I dati in letteratura sono contrastanti per quanto riguarda le delezioni "gr/gr", che inizialmente sono state riscontrate solo nel gruppo dei pazienti azoospermici ed oligozoospermici (Repping et al. 2003). La prima osservazione di Repping et al. (2003), che ha permesso di ipotizzare una possibile relazione causa-effetto tra questa delezione parziale e le anomalie della spermatogenesi, è stata confermata (de Llanos et al. 2005) ma poi contraddetta da uno studio sulla popolazione tedesca (Hucklenbroich et al. 2005).



Tabella 1 - Numero di copie geniche e di unità trascrizionali che restano nella regione AZFc a seguito dei diversi tipi di delezione: “b2/b4” (delezione completa della regione AZFc), “gr/gr”, “b2/b3” e “b1/b3”. Sia nella delezioni “gr/gr” che in quelle “b2/b3” si ha la perdita di due copie del gene DAZ e di una copia del gene CDY1.

Delezioni parziali della regione AZFc nella popolazione italiana
I dati sulla popolazione italiana studiata dal nostro gruppo (Giachini et al. 2005) hanno evidenziato la presenza di delezioni parziali (“gr/gr” e “b2/b3”) sia nel gruppo dei pazienti oligozoospermici ed azoospermici (n=150) che nel gruppo di soggetti normozoospermici (n=189). Quindi, al contrario di quanto osservato per le microdelezioni “classiche” delle tre regioni AZF, le delezioni parziali del cromosoma Y non sembrano, in prima analisi, specifiche per il danno della spermatogenesi e la correlazione genotipo-fenotipo risulta pertanto più complessa. Le delezioni “gr/gr” si sono rivelate più frequenti di quelle “b2/b3” (73% delle delezioni parziali osservate).
L’incidenza delle delezioni “b2/b3” nei due gruppi, pazienti e controlli, non è significativamente diversa (1,3% vs 0,5%), indicando un loro improbabile ruolo patogenetico per anomalie della spermatogenesi.
Le delezioni “gr/gr”, invece, si riscontrano più frequentemente nei pazienti rispetto al gruppo di soggetti normozoospermici (4,6% versus 0,5%; p<0,024); questo permette di ipotizzare un effetto negativo di questo polimorfismo sull’efficienza della spermatogenesi. Il valore di rischio relativo (O.R.=8,89), infatti, indica che queste delezioni possono essere considerate un fattore di rischio per l’alterazione della spermatogenesi ed in particolare per l’oligozoospermia severa. La media dei valori dei tre parametri seminali (numero, motilità e morfologia) nei pazienti con delezione “gr/gr” risulta inferiore rispetto a quella osservata nei pazienti senza delezione, anche se la differenza non risulta statisticamente significativa.
Una delle possibili spiegazioni alla variabilità fenotipica – compresa tra l’azoospermia e la normozoospermia – associata alle delezioni parziali può essere data dalla presenza di polimorfismi o mutazioni del gene omologo autosomico di DAZ, il gene DAZL, espresso anch’esso esclusivamente nel testicolo. Infatti, le evidenze sperimentali secondo cui il transgene umano di DAZ è capace di compensare parzialmente i difetti della spermatogenesi in topi knock out per DAZL (Slee et al. 1999) suggerisce una possibile interazione funzionale dei due geni. E’ plausibile quindi che alterazioni del gene DAZL possano influire sull’effetto delle delezioni parziali della regione AZFc (Yen 2004).
Un’altra spiegazione potrebbe essere fornita dal diverso numero e/o dal diverso tipo di copie geniche rimosse con la delezione parziale nei diversi soggetti. E’ possibile, infatti, che le diverse copie geniche non siano funzionalmente equivalenti. Infine, altri fattori sconosciuti legati al cromosoma Y, favorevoli o sfavorevoli (ad esempio duplicazioni, inversioni o polimorfismi) potrebbero influenzare il fenotipo del soggetto con delezione parziale.
Per testare queste ipotesi abbiamo intrapreso la determinazione delle basi molecolari del fenotipo variabile associato a queste delezioni parziali con: i) l’analisi mutazionale del gene autosomico DAZL e ii) l’analisi quantitativa e qualitativa delle copie geniche di DAZ e di CDY1 rimanenti nella regione AZFc a seguito di delezione.
L’analisi mutazionale di DAZL non ha rilevato nessuna nuova mutazione ma solo un polimorfismo comune anche nella popolazione dei normozoospermici; si presume, pertanto, che tale polimorfismo non abbia alcun effetto sulla spermatogenesi.
Il numero di copie geniche rimosse di DAZ e di CDY1 in ciascun tipo di delezione parziale è risultato, come previsto, sempre lo stesso in tutti i soggetti con delezione parziale (n=11).
Il tipo di copia genica “deleta”, invece, si è rivelato diverso; la presenza di differenti pattern genici è probabilmente dovuta a fenomeni differenti di inversione che sono insorti precedentemente alla delezione. Si possono pertanto distinguere tre diversi sottotipi di delezione parziale in funzione dei pattern genici originati, sia per quanto riguarda le delezioni “gr/gr” che per quelle “b2/b3”.
La delezione delle copie geniche DAZ1 e DAZ2, a differenza di quella di DAZ3 e DAZ4, è stata riscontrata solo nel gruppo dei pazienti; ciò determina una differenza significativa (p<0,037) tra pazienti e normozoospermici nella frequenza di delezione parziale associata alla perdita di DAZ1/2. Questo risultato è a favore dell’ipotesi secondo la quale le copie DAZ1/2 sono funzionalmente più importanti di quelle DAZ3/4 (Fernandes et al. 2002). Studi recenti, invece, non hanno riscontrato differenze tra la frequenza di delezione di DAZ1/2 nei pazienti e nei controlli (Machev et al. 2004); in questo caso però i controlli non erano stati selezionati sulla base della normozoospermia, bensì sulla loro fertilità.
In maniera analoga, la copia genica CDY1a risulta “deleta” solo nei pazienti; si osserva quindi una differenza notevolmente significativa (p<0,003) tra pazienti e normozoospermici nella frequenza di delezione parziale associata alla perdita di CDY1a.
Sebbene le delezioni “gr/gr” non siano specifiche per le anomalie della spermatogenesi, esse possono tuttavia essere considerate un fattore di rischio, soprattutto se associate alla perdita di CDY1a.
I nostri dati suggeriscono, quindi, che la rimozione di determinate copie geniche piuttosto che altre possa essere più compromettente per la spermatogenesi e questo spiegherebbe l’ampia variabilità fenotipica associata a queste delezioni, a parità di numero di copie rimosse.
Lo screening di una più ampia casistica di pazienti e di controlli opportunamente selezionati, che definisca in modo combinato il tipo ed il numero di copie geniche rimosse, permetterà di distinguere, tra i diversi sottotipi osservati, le delezioni parziali neutre da quelle compromettenti la spermatogenesi.

Aplogruppi del cromosoma Y e fertilità maschile
Sebbene le microdelezioni del cromosoma Y rappresentino la causa genetica (molecolare) più frequente delle anomalie della spermatogenesi, rimane comunque una alta percentuale (85-90%) di soggetti con azoospermia o oligozoospermia severa che non sono portatori di queste delezioni. Ma considerando che lo screening per le micodelezioni non è in grado di evidenziare altre anomalie genetiche – come ad esempio variazioni di sequenze ripetute in famiglie geniche multicopia, mutazioni o polimorfismi di geni specifici del cromosoma Y, riarrangiamenti (come duplicazioni ed inversioni) – è stato ipotizzato che altri fattori legati al cromosoma Y potrebbero contribuire nella determinazione dell’infertilità maschile. Queste alterazioni potrebbero segregare con determinati aplogruppi del cromosoma Y per cui la definizione dell’aplogruppo in pazienti con un numero ridotto di spermatozoi potrebbe essere il primo passo per l’identificazione di fattori Y-linked legati al danno testicolare. Infatti, sebbene tutti i cromosomi Y derivino da un cromosoma Y ancestrale, la presenza di polimorfismi (marker “binarici”) nelle regioni non codificanti permette di distinguere diversi gruppi monofiletici o aplogruppi del cromosoma Y; ciascun aplogruppo è caratterizzato dalla combinazione di una serie di marcatori polimorfici, come ad esempio polimorfismi di un singolo nucleotide o delezioni/inserzioni di sequenze di DNA (Krausz et al. 2004).
I polimorfismi del cromosoma Y, oltre ad essere utilizzati per studi forensi e per test di paternità, sono stati applicati recentemente nella medicina molecolare per lo studio di malattie specifiche per i soggetti di sesso maschile (come i disturbi della spermatogenesi, il cancro della prostata e del testicolo) o prevalentemente associate al sesso maschile (autismo, ipertensione). Data l’assenza di fenomeni di ricombinazione nella regione “non-ricombinante” o più recentemente chiamata “Male Specific Region Y” (MSY), i polimorfismi localizzati in questa regione sono fortemente associati con potenziali variazioni funzionali di malattie Y-linked.
La prima relazione tra infertilità e background del cromosoma Y è stata descritta in una rara forma di azoospermia, chiamata sindrome del maschio XX, in cui parte del braccio corto del cromosoma Y – compreso il gene SRY – risulta traslocato sul cromosoma X a seguito di un evento di ricombinazione ectopica. Il rischio di questa ricombinazione è maggiore in cromosomi Y appartenenti ad una particolare aplogruppo europeo in cui una inversione della sequenza implicata nella ricombinazione X-Y sembra predisporre a questa sindrome.
Una via indiretta per capire se i geni del cromosoma Y sono implicati nell’eziologia dei disturbi della spermatogenesi può essere lo studio di l’associazione tra background genetico (aplogruppo del cromosoma Y) e concentrazione degli spermatozoi; da queste analisi è risultato che alcuni aplogruppi possono predisporre ad una diminuita efficienza della spermatogenesi.
Per identificare eventuali associazioni tra uno specifico aplogruppo ed i disturbi della spermatogenesi sono stati condotti studi di associazione su tre differenti popolazioni (danese, giapponese ed italiana) in cui è stata analizzata la distribuzione dei diversi aplogruppi nei pazienti oligozoospermici/azoospermici e nella popolazione generale. Nella popolazione danese è stato osservato che uno specifico aplogruppo, detto aplogruppo 26, risulta significativamente più rappresentato nel gruppo dei pazienti azoospermici/oligozoospermici (27,8%) rispetto alla popolazione generale (1-5%). Questo significa che i soggetti che presentano un cromosoma Y appartenente all’aplogruppo 26 hanno un rischio relativo circa 9 volte maggiore di presentare disturbi della spermatogenesi rispetto alla popolazione generale (Krausz et al. 2001). Questo può essere dovuto alla presenza sul cromosoma Y di riarrangiamenti strutturali e di polimorfismi o ad un differente numero di copie geniche, che potrebbero influire negativamente sull’efficienza della spermatogenesi.
Per quanto riguarda la popolazione giapponese sono stati effettuati due studi (Kuroki et al. 1999; Carvalho et al. 2003) che hanno riportato risultati contrastanti: il primo ha evidenziato una associazione tra l’aplogruppo N e l’azoospermia mentre il secondo non ha rilevato alcuna associazione tra gli aplogruppi del cromosoma Y ed i pazienti oligozoospermici/azoospermici. Nella popolazione italiana il tentativo di trovare una relazione tra numero di spermatozoi e aplogruppi del cromosoma Y non ha avuto esiti positivi (Previdere et al.1999; Paracchini et al. 2002).
Le apparenti discrepanze tra i risultati di questi studi possono essere spiegate in vari modi. In primo luogo, il numero di campioni analizzati in questi studi era piuttosto piccolo e questo è una delle principali cause di scarsa riproducibilità degli studi di associazione. Oltre a questo, altri fattori – come l’attendibilità della conta spermatica, la selezione dei controlli secondo la loro “fertilità” piuttosto che per la “normozoospermia”, l’inclusione di pazienti con anomalie andrologiche – possono spiegare i dati contrastanti. Inoltre, gli aplogruppi del cromosoma Y variano tra le diverse aree geografiche e quindi gli aplogruppi associati ad una diminuita efficienza della spermatogenesi possono essere diversi nei vari paesi.

Conclusioni
L’esistenza sul cromosoma Y di una o più regioni coinvolte nella spermatogenesi è stata ipotizzata nel 1976 da Tiepolo e Zuffardi. Tuttavia solo dopo 20 anni, con l’aiuto della biologia molecolare, è stato possibile definire meglio queste regioni. Da allora il cromosoma Y gioca un ruolo centrale sia nella diagnostica dell’infertilità maschile – data la relativa alta incidenza di microdelezioni – che nelle ricerche di base indirizzate allo studio dei geni coinvolti nel processo spermatogenetico. La maggior parte delle incertezze e contraddizioni riguardo le “classiche” microdelezioni del cromosoma Y sono state risolte ed il loro significato clinico ormai è ben chiaro. Tuttavia la “saga” trentennale del cromosoma Y continua con altri punti interrogativi tra cui il ruolo delle delezioni parziali della regione AZFc nell’infertilità maschile e la funzione dei singoli geni AZF. E così del cromosoma Y parleremo ancora.

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